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(摘自海洋研究所)由中科院海洋所研究員宋林生等完成的”黑鯛腫瘤壞死因子α基因的重組表達方法”于日前獲國家發(fā)明專利授權(專利號:ZL200410050331.2)。該項發(fā)明涉及分子生物學技術領域,是黑鯛腫瘤壞死因子α(BS TNFα)基因的體外表達與純化技術,包括重組表達載體的構建、轉化、轉化子篩選和表達產(chǎn)物的分離純化和鑒定等技術環(huán)節(jié)。其中重組體的構建是根據(jù)黑鯛腫瘤壞死因子。預測成熟肽的cDNA序列設計引物,引入兩個不同的限制性內(nèi)切酶突變位點,然后克隆到表達載體,再將構建成的重組表達載體轉化大腸桿菌和酵母,篩選陽性克隆并以IPTG或甲醇誘導重組蛋白的表達。
利用親和層析對表達產(chǎn)物進行多級純化,獲得高純度體外表達的重組腫瘤壞死因子α。該產(chǎn)品可用于魚類免疫機制的理論研究,也可作為餌料添加劑、免疫增強劑、病害防治藥物等在生產(chǎn)方面進行應用。
目前,水產(chǎn)養(yǎng)殖動物高密度、集約化的快速發(fā)展,使得養(yǎng)殖病害日趨嚴重,各種病害頻繁爆發(fā),已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的主要瓶頸。各類農(nóng)藥、抗生素盲目無序和頻繁使用,不僅對病害的預防與治療沒有起到明顯作用,而且,由于這些藥物的大量使用嚴重破壞了自然生態(tài)環(huán)境,藥品的殘留已經(jīng)直接威脅到人類的健康,因此,發(fā)現(xiàn)和尋找通用性強、防治效果好、廣譜無污染的新型病害預防和治療藥物,成為人們亟待解決的重要課題之一。
南方漁網(wǎng)編輯:陳如燕
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