摘要：目前，批準(zhǔn)在人類(lèi)和動(dòng)物物種上使用的口服疫苗數(shù)量有限，開(kāi)發(fā)有效安全的口服疫苗對(duì)魚(yú)類(lèi)免疫學(xué)家一直是一個(gè)挑戰(zhàn)�？诜�疫苗效果不佳的重要原因是由于惡劣的胃環(huán)境對(duì)抗原的破壞，以及腸道環(huán)境的高耐受性和疫苗設(shè)計(jì)方法的不足。在本文中，我們討論了目前大規(guī)模養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)口服疫苗的開(kāi)發(fā)方法;借鑒人類(lèi)和獸醫(yī)疫苗的開(kāi)發(fā)經(jīng)驗(yàn)，從魚(yú)類(lèi)粘膜免疫學(xué)和新分子生物學(xué)的最新進(jìn)展的角度，提出了魚(yú)類(lèi)口服疫苗的設(shè)計(jì)方法;并討論了用斑馬魚(yú)作為預(yù)篩選動(dòng)物模型的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，旨在加快養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)疫苗的設(shè)計(jì)和驗(yàn)證。

　　1、引言

　　目前，用于養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的疫苗絕大多數(shù)是針對(duì)細(xì)菌病原體，只有少數(shù)是針對(duì)病毒的。目前市售疫苗的給藥途徑是口服(通過(guò)混飼)、浸泡、腹腔注射(ip)或肌肉注射(im)。雖然注射接種疫苗對(duì)魚(yú)的保護(hù)最有效，但操作難度較大。腹腔注射通常用于給予水包油型注射疫苗，而肌肉注射最常用于給予DNA質(zhì)粒。水包油型注射疫苗會(huì)產(chǎn)生局部副作用，包括組織炎癥、組織粘連或組織壞死。魚(yú)太小或不能注射接種疫苗的，可通過(guò)口服或浸泡接種疫苗，但這些方法通常效果不佳、保護(hù)周期短。目前，也有開(kāi)發(fā)出浸泡、口服和注射組合使用的疫苗接種方法來(lái)確保整個(gè)周期都能受到疫苗的保護(hù)。

　　口服疫苗免疫還存在誘導(dǎo)耐受后的潛在風(fēng)險(xiǎn)，特別是免疫功能不成熟的幼魚(yú)，因此，魚(yú)類(lèi)免疫學(xué)家考慮正在發(fā)展的粘膜疫苗。從動(dòng)物的福利和處理成本來(lái)看，魚(yú)用口服粘膜疫苗，將是疫苗接種的理想方法，但還沒(méi)有通過(guò)此途徑實(shí)現(xiàn)大規(guī)模疫苗接種。

　　本文在總結(jié)人用和獸用口服疫苗的基礎(chǔ)上，將粘膜免疫應(yīng)用于魚(yú)用口服疫苗研制，特別在抗原的類(lèi)型、劑量、滅活等方法上的研究。首先，通過(guò)探索病原體的性質(zhì)、魚(yú)體性質(zhì)和疫苗接種方面的共性，剖析魚(yú)口服傳遞抗原耐受的可能條件。其次，從免疫保護(hù)機(jī)制入手，針對(duì)抗原耐受性問(wèn)題和實(shí)現(xiàn)疫苗口服問(wèn)題進(jìn)行解決。再次，針對(duì)局部抗原呈遞細(xì)胞(APC)和M細(xì)胞進(jìn)行探究，選擇出促進(jìn)抗原粘附于M細(xì)胞或強(qiáng)烈激活局部非特異性免疫和特異性免疫應(yīng)答的粘膜免疫佐劑。

　　2、人類(lèi)和獸用疫苗的研究現(xiàn)狀

　　在哺乳動(dòng)物中，胃腸外抗原給藥會(huì)觸發(fā)弱的粘膜反應(yīng)，而在粘膜表面的抗原給藥會(huì)有效地觸發(fā)局部以及全身性的體液和細(xì)胞介導(dǎo)的反應(yīng)。在粘膜表面觸發(fā)對(duì)粘膜病原體的特異性免疫反應(yīng)保護(hù)的重要性是公認(rèn)的。

　　經(jīng)100多年研究，被批準(zhǔn)的人用粘膜疫苗僅有5個(gè)，包括四個(gè)口服疫苗，預(yù)防小兒麻痹病毒，輪狀病毒，沙門(mén)氏菌，傷寒和霍亂及一個(gè)鼻用抗流感病毒疫苗。

　　商業(yè)化的魚(yú)類(lèi)病原體的口服疫苗目前僅有大西洋鮭和銀鮭商業(yè)口服疫苗、大扇貝口服疫苗，前者用于抵御鮭魚(yú)立克次氏體、胰腺感染性病毒和傳染性鮭魚(yú)貧血病毒、虹鱒抗胰腺感染性病毒、彩虹鱒魚(yú)和鱸魚(yú)抗鰻弧菌;后者用于抵御加氏乳球菌。但與人類(lèi)口服疫苗類(lèi)似，魚(yú)用口服疫苗只能提供弱效或短期的保護(hù)。

　　3、當(dāng)前成功的和受關(guān)注的人類(lèi)及獸醫(yī)粘膜疫苗

　　所有許可使用在人類(lèi)和獸醫(yī)物種的口服疫苗都是針對(duì)粘膜病原體，這些粘膜病原體要么感染粘膜表面本身，要么以粘膜為入口，再進(jìn)行全身性感染。

　　只有少數(shù)成功的口服疫苗是在減毒活的病毒或細(xì)菌的基礎(chǔ)上，模仿病原體感染的途徑，并觸發(fā)強(qiáng)大的局部免疫反應(yīng)，且不需要任何額外的佐劑。減毒活疫苗的特點(diǎn)是安全性差，原因是不能保證病原體不會(huì)恢復(fù)到致病狀態(tài)以致易感人的發(fā)病。

　　出于方便和安全性的考慮，魚(yú)類(lèi)口服疫苗的抗原研究集中于使用滅活病原體(加熱或甲醛滅活)，雖沒(méi)有具體提到是否給予佐劑，但大多數(shù)疫苗都加入了抗原傳遞系統(tǒng)保護(hù)載體，旨在避免抗原在胃降解，也可能促進(jìn)抗原粘附粘膜表面，或可能作為局部的炎癥信號(hào)。滅活病原體的優(yōu)勢(shì)是相對(duì)安全，但其保護(hù)是弱效和短期的且與血清IgM水平有關(guān)，而疾病易感與血清IgM水平下降有關(guān)。另有報(bào)道，重復(fù)口服給藥(滅活病原體)可保證魚(yú)體在整個(gè)生產(chǎn)周期中的高血清IgM，說(shuō)明口服抗原可以引起全身反應(yīng)，但也說(shuō)明魚(yú)沒(méi)有建立強(qiáng)大的記憶效應(yīng)和形成耐受性。

　　4、非膠囊化魚(yú)類(lèi)口服疫苗研究策略與效果

　　現(xiàn)有的對(duì)疫苗效果研究報(bào)道主要包括，第一，鑒于目前成功許可的魚(yú)用疫苗，以及滅活病原體的方便性和安全性，大量的研究集中在使用非封裝(滅活的)細(xì)菌、酵母或植物表達(dá)細(xì)菌或病毒抗原。這種策略是基于細(xì)胞壁本身可能作為對(duì)腸道環(huán)境的自然保護(hù)屏障的假設(shè)成立下，在整個(gè)細(xì)胞中表達(dá)的抗原可能不需要進(jìn)一步的封裝。第二，在測(cè)試的時(shí)間(多為2-3個(gè)月)內(nèi)，按劑量連續(xù)給藥可實(shí)現(xiàn)足夠的誘導(dǎo)響應(yīng)并賦予保護(hù)，但多數(shù)只研究到最后一次免疫后的10～30天。第三，在劑量相同的情況下，添加佐劑的疫苗，可以增強(qiáng)疫苗效果。使用不同類(lèi)型的細(xì)胞疫苗，與無(wú)佐劑的相同疫苗比較，添加25% V / V 10%鉀硫酸鋁可增加虹鱒對(duì)鰻弧菌的抵抗力。第四，腸道微生物可能是合適的疫苗載體，共生可以維持他們定居腸道并在粘膜表面持續(xù)傳遞抗原的能力。

　　盡管存在很多有前途的方法，但仍然很難系統(tǒng)的解決使用劑量、疫苗類(lèi)型、疫苗效能的長(zhǎng)期保護(hù)(>3個(gè)月)等問(wèn)題，且大多數(shù)研究中的病原體感染沒(méi)有采用自然的感染途徑。

　　5、膠囊化口服疫苗的研究對(duì)策與效果

　　對(duì)比前面提到的細(xì)菌或酵母和植物疫苗，很多更脆弱的疫苗如DNA質(zhì)粒，純化的重組蛋白和亞單位疫苗，的確需要一種保護(hù)形式。在許多動(dòng)物物種中，可溶性的、非粘附的抗原通常在低水平時(shí)被占用，若在腸道中，這種抗原通常引起免疫耐受。相反，通過(guò)粘附聚合物或耦合到自身粘附于上皮表面的蛋白質(zhì)上得以保留在粘膜表面的抗原可增強(qiáng)粘膜的免疫反應(yīng)。在小鼠和其他幾種動(dòng)物上的研究清楚表明，微膠囊化的疫苗對(duì)于粘膜遞送具有優(yōu)勢(shì)，表現(xiàn)在：M細(xì)胞特別容易將微粒主動(dòng)運(yùn)輸?shù)接尚∧c粘膜遠(yuǎn)端大量淋巴濾泡組成的集合淋巴結(jié)，小微粒(直徑1毫米)粘附到M細(xì)胞的利用效率最高。此外，絨毛上皮細(xì)胞頂面、集合淋巴結(jié)濾泡相關(guān)的上皮細(xì)胞和M細(xì)胞上的特殊糖脂和蛋白糖鏈在抗原粘附方面發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。已發(fā)現(xiàn)，大西洋鮭魚(yú)腸道有類(lèi)似哺乳動(dòng)物的M樣細(xì)胞，這些細(xì)胞在功能上是等價(jià)的，但表型不同。可以肯定，微膠囊技術(shù)可以用于進(jìn)一步提高上述滅活細(xì)菌、酵母或植物疫苗的吸收。

　　但需要注意，接種疫苗的最大劑量受制于日采食量和疫苗微囊化后的包封率，而包封率在很大程度上取決于被選擇封裝的載體與細(xì)菌結(jié)合的狀態(tài)和生物包埋后的穩(wěn)定性。疫苗的劑量和暴露時(shí)間，特別是在幼齡動(dòng)物，對(duì)疫苗療效是非常關(guān)鍵的，這些因素確定能導(dǎo)致免疫應(yīng)答或耐受的差異。一些聚合物，如殼聚糖、乳酸-乙醇酸(PLGA)、海藻酸鹽、脂質(zhì)體已經(jīng)應(yīng)用于微囊化疫苗，例如，海藻酸鹽包裹減毒或無(wú)毒的活腸道病原菌和病毒后，在通過(guò)消化道時(shí)，藻酸鹽的駐留能保護(hù)微生物和質(zhì)粒，并且通過(guò)腸道粘液層擴(kuò)散，從而達(dá)到細(xì)胞表面，與上皮細(xì)胞接觸，藻酸鹽可被抗原細(xì)胞攝入，并傳遞微生物或DNA質(zhì)粒，腸道病原體有可能激活局部粘膜反應(yīng)，而DNA質(zhì)粒可以進(jìn)入細(xì)胞核，采用類(lèi)似在病毒感染過(guò)程中的方式來(lái)觸發(fā)抗原表達(dá)。

　　6、魚(yú)用口服疫苗的合理免疫方法

　　毫無(wú)疑問(wèn)疫苗觸發(fā)適當(dāng)?shù)拿庖咄緩绞菍?duì)抗病原最有效的方法，但這種適當(dāng)?shù)拿庖叻磻?yīng)是如何實(shí)現(xiàn)的呢?

　　病原體引發(fā)全身體液免疫反應(yīng)是適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)，滅活微生物、蛋白佐劑疫苗、病毒樣顆�；蚱渌麃唵挝灰呙缱阋砸�發(fā)足夠的全身性免疫反應(yīng)。

　　然而，從目前的研究來(lái)看，專(zhuān)門(mén)引起全身性體液免疫的疫苗，可能不是有效的對(duì)粘膜(腸道)的病原體，因?yàn)槟c外免疫難以有效地引起粘膜反應(yīng)。

　　在人類(lèi)和其他獸醫(yī)物種，減毒活的病原體(細(xì)菌或病毒)和非復(fù)制的DNA質(zhì)粒已被開(kāi)發(fā)出來(lái)，在強(qiáng)佐劑存在下通過(guò)腸外途徑可引起全身性的細(xì)胞介導(dǎo)的T細(xì)胞反應(yīng)。最重要的是，抗原在宿主的復(fù)制和疫苗佐劑的存在會(huì)引發(fā)局部免疫細(xì)胞和抗原遞呈細(xì)胞活化，免疫細(xì)胞的激活是抗原呈遞給CD8+T細(xì)胞，通過(guò)MHC-I類(lèi)途徑以及呈遞給CD4+輔助性T細(xì)胞通過(guò)交叉性途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)。病毒粒子在APC表面的表達(dá)也會(huì)激活抗原特異性B細(xì)胞。Th1細(xì)胞分泌IFNγ將進(jìn)一步維持B細(xì)胞活化，產(chǎn)生抗體。因此，這樣的反應(yīng)有助于激活一個(gè)完整體液效應(yīng)，并觸發(fā)病毒或其他細(xì)胞內(nèi)病原體的細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)。有趣的是，DNA質(zhì)粒，雖不能在宿主細(xì)胞中復(fù)制，但已被證明可有效地觸發(fā)免疫系統(tǒng)，特別是在魚(yú)類(lèi)，其使用劑量可比哺乳動(dòng)物低100倍。一般認(rèn)為，魚(yú)類(lèi)的免疫機(jī)制是保守的，體液和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)與全身和粘膜免疫接種保護(hù)有關(guān)。血清IgM水平與疫苗接種方法相關(guān)，特別是對(duì)于細(xì)胞外病原體。近年來(lái)，在鯽魚(yú)和鱒魚(yú)對(duì)T細(xì)胞標(biāo)記CD8和CD4的單克隆抗體開(kāi)發(fā)就很好的說(shuō)明了T細(xì)胞對(duì)感染和接種疫苗的反應(yīng)。另外，2005年，在鱒魚(yú)上發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的免疫球蛋白類(lèi)型命名為IGT，可更好地描述魚(yú)類(lèi)疫苗與系統(tǒng)和粘膜反應(yīng)。最近對(duì)魚(yú)類(lèi)粘膜免疫機(jī)制的研究也有報(bào)道。

　　7、口服疫苗觸發(fā)保護(hù)性體液免疫和細(xì)胞介導(dǎo)的反應(yīng)

　　要觸發(fā)保護(hù)性體液免疫和細(xì)胞介導(dǎo)的反應(yīng)，應(yīng)從以下幾方面考慮：

　　首先，M樣細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞靶向作用于魚(yú)腸道。當(dāng)抗原或疫苗通過(guò)口服途徑給藥，它們與共生的腸道微生物都會(huì)面臨著同樣的宿主防御機(jī)制。口服疫苗需克服胃環(huán)境、蛋白酶或核酸酶的攻擊，并穿透厚厚的黏液到達(dá)上皮屏障。因此，需要口服大量抗原，因?yàn)椴豢赡芫�確確定到達(dá)上皮層的抗原數(shù)量。只有疫苗與頂端上皮細(xì)胞接觸，才可以被攝取并傳遞到基底側(cè)，抗原遞呈細(xì)胞才能處理它。在哺乳動(dòng)物，抗原需先經(jīng)攝取后，由M細(xì)胞傳遞給濾泡相關(guān)上皮細(xì)胞和絨毛上皮細(xì)胞的頂端部分。M細(xì)胞利用細(xì)胞質(zhì)運(yùn)輸?shù)哪遗輰⒓?xì)菌、病毒、可溶性微生物產(chǎn)物或顆粒抗原傳遞到基底膜的白細(xì)胞。M細(xì)胞形成一個(gè)白細(xì)胞可以聚集在內(nèi)的“口袋”，“口袋”減少了頂端和基底之間的距離，從而提高抗原到達(dá)白細(xì)胞的效率。除了M細(xì)胞，專(zhuān)門(mén)的樹(shù)突狀細(xì)胞通過(guò)上皮層延伸直接在管腔內(nèi)釋放抗原。在激活局部免疫反應(yīng)時(shí)，M細(xì)胞和上皮的樹(shù)突狀細(xì)胞成為疫苗交付的直接目標(biāo)。已有報(bào)道，鮭魚(yú)上皮層內(nèi)具有一定數(shù)量的M樣細(xì)胞，向管腔側(cè)延伸胞質(zhì)突起并攝取BSA微粒。雖然M樣細(xì)胞的特異性標(biāo)志物在魚(yú)類(lèi)中尚未確定，但有報(bào)道，鮭魚(yú)M樣細(xì)胞類(lèi)似于哺乳動(dòng)物的M細(xì)胞，在荊豆凝集素(UEA-1)中為陽(yáng)性，在麥胚凝集素(WGA)中為陰性。UEA-1的單個(gè)陽(yáng)性細(xì)胞僅見(jiàn)于絨毛粘膜褶皺深處，而不在頂部區(qū)。雖白細(xì)胞不在基底的“口袋”，但認(rèn)為巨噬樣細(xì)胞與基底側(cè)的M樣細(xì)胞相關(guān)。已證明魚(yú)類(lèi)腸道和上皮的巨噬細(xì)胞在第二腸段的抗原攝取中發(fā)揮作用。上皮內(nèi)巨噬細(xì)胞能有效地?cái)z取和運(yùn)輸抗原，尤其是當(dāng)抗原結(jié)合到腸道粘附分子上。另外，在外周部位也能觀察到能運(yùn)輸抗原的游離巨噬細(xì)胞。魚(yú)類(lèi)巨噬細(xì)胞的標(biāo)記物僅存在于少量魚(yú)種中。然而，它們可作為模型魚(yú)類(lèi)中假定的APC的特有目標(biāo)，證明細(xì)胞特異性抗原傳遞途徑的適應(yīng)性。

　　其次，考慮誘導(dǎo)免疫耐受和抗原劑量的關(guān)系。在哺乳動(dòng)物中，體內(nèi)存在著內(nèi)在平衡機(jī)制，即免疫耐受和免疫效應(yīng)，是設(shè)計(jì)口服疫苗的主要障礙。已有報(bào)道，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的誘導(dǎo)和耐受與抗原劑量相關(guān)。在哺乳動(dòng)物中，高劑量的口服抗原會(huì)誘導(dǎo)失效和抗原特異性T細(xì)胞的缺失，而低抗原劑量會(huì)觸發(fā)T細(xì)胞發(fā)育。在魚(yú)類(lèi)，雖耐受性誘導(dǎo)機(jī)制還沒(méi)有系統(tǒng)的解釋?zhuān)�但抗原的劑量和給藥途徑也與耐受性相關(guān)。由于難以精確確定粘膜表面的抗原量，很難在規(guī)范條件下判定該疫苗會(huì)不會(huì)產(chǎn)生耐受性。從口服疫苗發(fā)展前景來(lái)看，疫苗抗原不應(yīng)僅是在固有膜內(nèi)傳遞到抗原呈遞細(xì)胞，而且應(yīng)該有較強(qiáng)的能打破腸道耐受性的刺激信號(hào)。因此使用強(qiáng)大的黏膜免疫佐劑疫苗或復(fù)制型疫苗會(huì)更有幫助。

　　再次，模仿病原體進(jìn)入并激活粘膜反應(yīng)。模仿病原體制備的疫苗包括：以減毒腸道致病菌作為疫苗載體的減毒活疫苗，包裹的DNA質(zhì)粒和激活有效的粘膜免疫應(yīng)答，重組減毒活疫苗載體。

　　8、合理的疫苗設(shè)計(jì)和未來(lái)疫苗的新方法

　　近年來(lái)，采用活病毒載體作為疫苗載體，是設(shè)計(jì)疫苗新的方向。這些活病毒載體包括桿狀病毒、甲病毒、腺病毒等。它們具有一些共同點(diǎn)：1)可以被修飾并在自然物種上使用而不具有致病性;2)能夠在真核細(xì)胞中遞送核酸，由宿主細(xì)胞自身允許疫苗抗原表達(dá);3)通過(guò)假型化的病毒，可以設(shè)計(jì)成靶向作用于被感染細(xì)胞;4)簡(jiǎn)單的克隆和變異策略。

　　9、目前最理想的口服疫苗的改進(jìn)方法：粘膜佐劑

　　在口服給藥時(shí)，非復(fù)制的抗原，如可溶性蛋白，質(zhì)粒DNA的免疫原性很差，因?yàn)樗鼈儫o(wú)法引發(fā)適當(dāng)?shù)难装Y刺激信號(hào)。有效的粘膜免疫佐劑的使用可以大大提高這些疫苗的有效性。這些佐劑，包括以下幾種，一是借鑒人用或其他物種疫苗的傳統(tǒng)佐劑，如明礬、弗羅佐劑、脂質(zhì)體、皂苷、角鯊烯等;二是腸毒素，腸毒素及腸病原體本身，無(wú)論是作為活的傳遞載體還是滅活的病原體，都可提供足夠的刺激信號(hào),都可用于口服免疫制劑的佐劑;三是分子佐劑，即以DNA質(zhì)粒編碼分子或以RNA為基本成分的載體分子作為分子佐劑是可能的，但從目前來(lái)看，這些分子佐劑用于魚(yú)類(lèi)的口服免疫還很局限。四是基于PAMPs的粘膜佐劑，在魚(yú)類(lèi)研究中，關(guān)于模式識(shí)別受體、清除劑受體及C型凝集素的鑒定及特征性描述已取得一定進(jìn)步，可為合理佐劑設(shè)計(jì)提供方向。已有報(bào)道，聚肌胞苷酸(poly I:C一種干擾素誘導(dǎo)劑)比較適合作為魚(yú)類(lèi)疫苗佐劑，但用于口服疫苗佐劑仍需要評(píng)估。五是以植物蛋白作為免疫刺激劑打破粘膜耐受性。

　　10.關(guān)于魚(yú)的習(xí)性和環(huán)境因素的考慮

　　已有研究表明，選擇與魚(yú)環(huán)境相匹配的封裝方法是十分重要的。在飼養(yǎng)條件下，測(cè)試疫苗對(duì)靶動(dòng)物是否有效，與魚(yú)種、所處環(huán)境差異及養(yǎng)殖條件有重要的關(guān)系。因此，水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物口服疫苗的設(shè)計(jì)，應(yīng)盡可能考慮不同魚(yú)種的生活環(huán)境和飲食習(xí)慣的差異性。

　　11、斑馬魚(yú)作為水產(chǎn)動(dòng)物的動(dòng)物模型

　　疫苗驗(yàn)證須在合適的物種和其自然生長(zhǎng)環(huán)境最相似的條件下進(jìn)行。采用斑馬魚(yú)為模型有助于我們盡快搞清楚有關(guān)疫苗的特征和宿主的免疫反應(yīng)，例如，口服傳遞抗原對(duì)吸收、分布和激活的免疫反應(yīng)有相對(duì)貢獻(xiàn)的特定細(xì)胞類(lèi)型等的信息。已有以斑馬魚(yú)腸道生理和其潛在應(yīng)用為模型進(jìn)行研究報(bào)道。斑馬魚(yú)可以證明采用新方法開(kāi)發(fā)的口服疫苗的有效性，有助于加速抗原、佐劑、疫苗傳遞載體和封裝方法的選擇。

　　當(dāng)然，使用斑馬魚(yú)作為模型在水產(chǎn)養(yǎng)殖物種中仍有一定的局限性。由于雜食動(dòng)物和食肉動(dòng)物的腸道菌群和腸道環(huán)境的不同，斑馬魚(yú)是鯉科和淡水魚(yú)類(lèi)的合適模型，但不太適合作為鮭魚(yú)、鱒魚(yú)、大菱鲆、鯛科魚(yú)類(lèi)或鱸魚(yú)的模型。

　　12、結(jié)語(yǔ)

　　借鑒人類(lèi)和獸醫(yī)口服疫苗方面所取得的成功，魚(yú)類(lèi)口服疫苗可從中吸取經(jīng)驗(yàn)。由于養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的物種及其病原體的多樣性，現(xiàn)有口服疫苗難以滿(mǎn)足市場(chǎng)需求。盡管在過(guò)去30年中，已有一些有關(guān)魚(yú)粘膜免疫學(xué)的研究，但仍處于起步階段，這與硬骨魚(yú)類(lèi)的物種差異性大有關(guān)。

　　近5～10年，魚(yú)粘膜免疫也有新發(fā)現(xiàn)，包括IgT或M樣細(xì)胞、粘膜免疫學(xué)和疫苗學(xué)，結(jié)合對(duì)魚(yú)內(nèi)臟的研究表明，M樣細(xì)胞或抗原呈遞細(xì)胞將為魚(yú)類(lèi)疫苗給藥提供一種可行的選擇。

　　從分子印跡技術(shù)和遺傳學(xué)的角度，斑馬魚(yú)動(dòng)物模型可加快魚(yú)類(lèi)疫苗開(kāi)發(fā)，類(lèi)似其他動(dòng)物模型有助于人類(lèi)和獸醫(yī)領(lǐng)域。對(duì)于如何接種口服疫苗、以及設(shè)計(jì)突破粘膜耐受性的策略，宿主粘膜反應(yīng)和魚(yú)類(lèi)腸道微生物群的信息是必不可少的。另外，學(xué)術(shù)界的同行和養(yǎng)殖戶(hù)之間協(xié)作，對(duì)生產(chǎn)商業(yè)安全有效的魚(yú)用疫苗也是有幫助的。

　　來(lái)源：Oral vaccination of fish: Lessons from humans and veterinary species，Developmental and Comparative Immunology 64 (2016) 118-137

　　唐曉瑩 徐靜等

　　本稿為水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物疾病防控技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程實(shí)驗(yàn)室原創(chuàng)編譯整理