中國水產門戶網報道大鯢俗稱娃娃魚，是國家二類保護水生野生動物，是農業產業化和特色農業重點開發品種；是野生動物基因保護品種。二十多年來，娃娃魚尚未實現規模化繁殖。對此，我們深入研究了娃娃魚的發育生物學，發育神經生理學及繁殖生物學等基礎學理論。運用現代分子生物學、基因學等新技術，創新了娃娃魚繁殖技術，實現了娃娃魚規模化繁殖，這對保護、增殖其資源提供了一個技術平臺。

　　1.仿生態環境
　　仿生態環境條件優劣，關系到親體培育性腺發育是否成熟。仿生態環境主要包括仿生態親體培育池、人工控溫、人工控光、人工調節水質等。
　　1.1 人工控溫 水溫是娃娃魚性腺發育的決定因素。親體培育首要工作是將水溫調控在其性腺發育所需最佳范圍18℃～23℃。親體性腺發育具有明顯的季節性周期，即每年3～9月。針對這一季節性周期，春季因親體池水溫偏低，故將水溫升高到18℃～23℃；使親體早開口攝食。以豐富的營養滿足其性腺發育。夏季又因水溫較高，不利于親體生長發育，故要將水溫降到18℃～23℃。水溫日變幅不要超過±1.5℃。
　　1.2 光照調節 娃娃魚喜暗、怕光有背光運動的習性。光照在娃娃魚性腺發育及產卵、受精的生命過程中發揮重要作用。強光照抑制親體性腺發育成熟和產卵、排精。暗光卻促進親體性腺發育成熟。實驗研究結果表明：在強光條件下親體性腺發育ⅲ期至ⅳ期初時，大部分精卵巢退化。因此，親體培育光照嚴格控制在300～500lx。也就是完全暗光。
　　1.3 水質調節 親體池水要求：礦化度高、硬度大、透明度大，ph6.5～7.5。良好的水質是親體培育的重要生態因子。廣東、湖南、浙江、四川、湖北、河南、江蘇等省這幾年來，娃娃魚人工繁殖產苗率低的一個重要因素是水質不佳（有的地方是用深井水，有的地方是用嚴重污染的河水過濾后培育親體）。水質調節主要工作是勤換水、勤排污、定期沖洗池底，定期用活菌凈水劑調節水質。最好的辦法是將親體池建在石灰巖山溪間。
    2 親體培育
　　2.1 營養與飼料 營養豐富的飼料是親體性腺發育的物質基礎。親體培育期間，飼料中蛋白質含量為42%～45.8%，糖為10%～12%，脂肪為2%～3%，維生素、礦物質為1.5%，中藥促性成熟添加劑2%～3%，其他7%～18%。飼料蛋白質中的氨基酸平衡極為重要，不容忽視。親體培育期間，要依據它的性腺發育不同時期，投喂含量不同的中藥促進性腺發育的人工配合飼料。投喂中藥配合飼料及投喂含有促進生殖細胞發育及dna的合成添加物是親體培育的關鍵技術之一。
　　2.2 親體放養 娃娃魚親體放養主要有兩種方式：一種是雌、雄混養、一種是雌、雄單獨養。
　　2.3 親體培育 娃娃魚親體培育技術是實現規模化繁殖的關鍵所在。娃娃魚規模化繁殖的重要前提是要培育出大量性成熟親體；特別是要有較多的性成熟的雄性親體。
　　娃娃魚性腺發育具有季節性周期，即每年3～4月開始發育；7～10月成熟。根據這一季節性周期。人工培育親體主要采用：冬季、春季、產前及生理學方法。
　　2.3.1 冬季培育 冬季培育是指親體產后體虛階段。這一階段親體培育的目的是給娃娃魚補充大量營養物質；使親體產后迅速恢復健康。冬季培育主要工作是調控水溫和投餌。水溫調控分兩個階段，首先是將水溫控制在18℃～22℃，使親體大量攝食，儲備充足營養越冬；然后是將水溫降至10℃以下，使親體進入冬眠。冬眠能使親體翌年性腺發育。冬季餌料投喂是以人工配合飼料為主，在配合飼料中還要添加0.5%的賴氨酸和0.5%的維生素。

　　

　　2.3.2 春季培育 春季培育主要工作是調控水溫、調節光照，調節水質及投餌。調控水溫是指春季親體培育池水溫偏低，所以用升溫的方法將水溫升到18℃～23℃，從而使親體早攝食，以便有豐富的營養滿足它的性腺發育。調節光照是指將親體池光照嚴格控制在500lx左右，即黑暗光線下培育親體。調節水質是指調節好親體池水質，使池水礦化程度高、硬度大、透明，保持清新。投餌則是投喂促進親體性成熟的中藥配合飼料和投喂促進親體生殖細胞dna合成的添加物。投喂餌料要求鮮、新、質優、無公害。適當控制投喂量。
　　2.3.3 產前培育 產前是親體性腺發育成熟的重要時期，因此，產前培育主要采用生態學和生理學相結合的方法進行強化培育。
　　生態學方法：野生娃娃魚是在深山峽谷溪河、陰河有回流水和冒泉水的地方繁衍生息。因此，人工培育親體，首先是要建造一個仿生態池。同時在產前培育階段，要將水溫控制在18～20℃。由于產前培育是夏季，自然水溫較高，所以降溫辦法是用空調，雖然用空調降溫可以達到產前培育目的，但存在著空調費用大及水溫波動而影響親體性腺的不利因素。最佳可靠的辦法就是在山區打一個隧道建親體培育池。這樣就是自然降溫，并且水溫穩定，有利于親體性成熟。城市可以在人防工程內建親體池，也是自然降溫。但存在一個問題是水源不是天然水。調節光照是指將親體池光照控制在暗光條件下。也就是光照強度為300～500lx。沖水是產前培育的一環，每天沖水2次、每次0.5h。
　　生理學辦法：主要是將促進親體性成熟的中藥制劑注射到親體體內，從而提高了親體性成熟率。其次是投喂促性成熟的中藥配合飼料及促進親體生殖細胞基因合成的活性餌料。娃娃魚體內，聯結神經系統與性腺的垂體是生殖細胞發育成熟的重要器官。中藥生精注射液的藥理、藥效研究結果顯示它能促進娃娃魚腦垂體釋放激素，提高了血清中gth的含量；從而提高了親體性成熟。
　　3 人工繁殖
　　3.1 親體選擇 親體選擇直接影響催產率的高低。由于親體性成熟特征不明顯，因此，人工選擇親體時，往往選不好性成熟親體，造成催產失敗。我們采用經驗選擇與b超檢查相結合的方法，提高了選擇性成熟親體的機率。
　　雄性親體性成熟特征：泄殖孔隆起圈上小白點明顯突出，內周邊有充血現象。
　　b超檢查：精巢長6～9cm、寬為0.8～2.6cm。聲像圖顯示：精巢外形飽滿、中間無溝，表明性成熟。
　　雌性親體性成熟特征：泄殖孔充血，腹部膨大柔軟和富有彈性感。
　　b超檢查：卵徑5～7cm；聲像圖顯示：卵巢中卵泡增大，卵呈單個鏈珠，表明性成熟。
　　3.2 人工催產 ①催產劑：lrh-a、hcg；②催產劑量（按新標準執行）；雌性：lrh-a0.2～150μg/kg＋hcgl0～15001u/kg。雄性：上述劑量減半；③催產方法：親體催產注射部位均為背部肋間，進針0.5cm；④催產效應：親體催產后，產卵效應時間為4～11d。其中最佳時間是4～6d；⑤人工授精。
　　娃娃魚人工授精采用干濕法，其操作步驟是：首先當發現雌體產出卵膜后、一人立即用手輕托卵帶放入搪瓷盆中；另一人則將成熟好的雄性親體捉起來放入活動布擔架中。然后一人用手輕擠雄性后腹，見泄殖孔有乳白色精液時，另一人用干凈瓷碗在泄殖孔接流出的精液，加入精子營養液。最后將精液倒入卵帶盆中；輕晃卵帶盆，使卵受精均勻。15min后加入干凈水；靜置20min后，將卵帶盆的水換兩次。接著把卵帶放入塑料籃中懸浮于孵化池中，即進入孵化期。
　　3.3 人工孵化
　　3.3.1 孵化的生態環境 水源可用自來水、山溪水、泉水。泉水孵化時，先要將泉水抽入蓄水池磁化后，加溫放入孵化池。否則用泉水特別易感染水霉。水溫對孵化影響很大。水溫21℃～23℃，孵化時間為28～30d；水溫18℃～20℃，孵化時間為35山水溫16℃～18℃，孵化時間為40～45d。孵化水溫日變幅不要超過±1.5℃。孵化水溫過高易造成胚胎死亡或是造成畸形苗。所以孵化期間水溫最佳范圍是20℃～22℃。受精卵對水的含氧量要求不低于5mg/l。受精卵必須是在暗光條件下孵化。光照要求嚴格控制在300～500lx范圍內。
　　3.3.2 人工孵化 受精卵采用靜水流水兩種方法孵化。靜水孵化時，早晚各換水一次。泉水流水孵化時，先要將泉水升溫，然后才能流入孵化池。因為低溫泉水孵化易使受精卵感染水霉。無論是靜水孵化，還是流水孵化，都要定期用水霉凈消毒。以免胚胎受水霉侵害。
　　孵化期間注意幾點事項：一是每天控制好水溫和光照。水溫控制在20℃～22℃。光照控制在300～500lx內；二是防治水霉，由于孵化期水溫低，且是用泉水孵化。因此，定期用水霉凈預防是防治水霉有效措施；三是防止胚胎“貼殼”，即定期輕翻受精卵。
　　4 小結
　　娃娃魚規模化繁殖技術關鍵因素是：一是要建造一個仿娃娃魚在自然界棲息場所的生態池及用原產地的天然水。近20年來從娃娃魚人工繁殖出苗低的情況來分析，有的地方是用深井水，有的地方是用污染嚴重的河水過濾后作為水源，這是娃娃魚繁殖出苗低的一個重要原因。可見娃娃魚繁殖基地最好是建在原產地；二是要培育出大量性成熟親體。由于娃娃魚性成熟率一般只有26.2%，并且在這26.2%里面還有雄性精液質量差及雌、雄性腺發育不同步，所以娃娃魚繁殖至今未實現規模化，即苗種大量生產。我們研究雄性性成熟率低的根本原因是精子活力差。它的病因用中醫學來講是屬“腎陽虛”，現代醫學來講則是屬內分泌功能紊亂。因此，我們研制了中藥生精散，有效解決了雄性精子活力差的問題。我們在武漢某公司工作時、由于親體數量較少，加之培育期短，也未繁殖出幼苗，這是娃娃魚繁殖不同于四大家魚和其他特種水生動物繁殖之處。另外要注意的是，要今年繁殖出娃娃魚苗，親體必須是頭一年10月～12月引進魚池的。當年引進親體、當年很難繁殖出魚苗。這一點應該引起從業人員足夠重視；三是選擇好性成熟親體。近幾年來，我們在各地繁殖實踐中，催產時只注射lrh-a0.2pg/kg＋hcgl01u/kg，娃娃魚產卵達到93%，受精率達到82.3%，孵化率為56.5%。由此可見娃娃魚能否實現規模化繁殖，關鍵技術點、核心技術點就是要人工培育出大量性成熟的親體。


南方漁網編輯：陳珍