中國水產門戶網報道 一、人工采卵授精
(一)催產劑及注射方法
鱘魚的人工繁殖采用類固醇激素類似物及絨毛膜促性腺激素作為催情藥物。一般采用一次注射,也有采用二次或三次注射的情況。在產卵場捕獲的雄性親鱘,性腺成熟度情況都較好,不需要注射,輕壓腹部就有精液流出,精液質量好。在顯微鏡下觀察,精子大,游動能力強,時間長,鱘魚的精子與其他魚類精子相比個體大,壽命長,在無激活的情況下,4℃保存24小時不會影響受精質量。如果雄親鱘壓腹部無精液流出,則考慮進行一次注射。雌親鱘的注射次數主要視其性腺發育的成熟程度而定,一般成熟度好,性腺已處于IV期末的,采用一次注射即可。若性腺成熟較差或成熟不夠完善,最好采用二次或三次注射為宜,其原因是經過二次或三次注射后,卵巢從IV期過渡到V期時,不會造成生理反應過于激烈和生理機能失調。部分雌親鱘,性腺發育處于Ⅲ期,若注射三次,也不會生產。這種魚是處于不生產年,但有在產卵場出現的現象。雄鱘如需注射,其劑量一般為雌鱘注射劑量的1/15到1/10,雌鱘在催產中如有類固醇激素類似物,注射劑量為200~400微克/千克體重。史氏鱘的催產效應時間,即發效應時距通常比家魚長一些,一般在30~50小時左右。但也有少部分雌鱘,因卵巢成熟度好,在進行催產時,卵巢已接近V期,所以注射適量催產藥物之后,催產效應期很短,有的在24小時內(個別的甚至更短)即可發效排卵,并且催產率和受精率也都高。因此注重選擇成熟度好的雌鱘,適時適量地進行催產注射是極為重要的。同時注意準確地掌握催產后鱘魚卵粒的成熟變化過程及發效時間,適時進行采卵授精,避免因魚卵過熟而降低受精率或魚卵自產池底。檢查卵粒成熟的情況,可通過擠壓腹部視其有無成熟的卵粒流出,或根據腹部柔軟程度加以判斷。
(二)采卵授精
在實際工作中,采集野生親魚進行人工催產時,往往存在著隨機性和偶然性。有時雌魚的卵已成熟自流,卻找不到合適的雄魚,沒有成熟的精液可用,無法授精,為此除有計劃地多儲備些雄親魚外,還應采用離體保存法,在4~5℃條件下經常保存一定量精液備用。在雌魚排卵前給雄魚注射,可以每2~4小時采一次精液保存,受精時則有兩手準備。
在準備掌握催產效應時間的基礎上,適時采卵是非常關鍵的一步,采卵過早,卵沒有完全成熟排出,采卵過遲易出現過熟,而無法受精,鱘魚的生殖器官結構與硬骨魚類有所不同,雌鱘卵粒成熟后,濾泡破裂,釋卵于腹腔內,自然狀態下,由于雌鱘魚的生殖動作,成熟的卵會通過輸卵管前段的喇叭口進入輸卵管,再排出體外。喇叭口位于腹腔的中部,人工擠壓法是很難將大部分成熟卵擠出的。根據具體情況,鱘魚的采卵可有擠壓法、殺魚取卵法和活體取卵手術法三種選擇。
1.擠壓法
適用于較小型的成熟度很高的親魚,雌魚達到成熟排卵后,用手先從雌魚腹后部向前推壓,再由前向后推壓,并重復這一動作。目的是體腔后部的游離卵粒盡可能地擠入喇叭口,最后經輸卵管排出。這種方法很難把所有成熟卵擠出,總會有相當一部分擠不出來,但此法能有效地保留雌魚。人工養殖的或低齡的親魚,最好采用這種方法采卵。
2.殺魚取卵法
主要用于野生的親魚采卵,目前在黑龍江邊的產孵操作還主要采用這種方法。取卵前先切斷雌魚的鰓動脈或尾動脈放血,然后剖開腹腔取卵。這種方法雖可取出全部成熟卵,但親魚也同時被斷送了。
3.活體手術取卵
曲秋芝等(1997)用此法對史氏鱘親魚試驗并獲成功。親魚的性腺達到成熟后,將魚腹面向上放在有頭兜的擔架上,用一根膠管通入口中供水,保證鰓部有清潔的水通過。在腹腔中后部,腹中線與腹骨板之間,開一個7~8厘米的口,將成熟分離的卵盡量取出,然后用尼龍線縫合切口。將魚放回清潔的魚池中。手術可以持續30~50分鐘。雖不能全部取出成熟卵,手術也不可能百分之百成功,但大多數親魚會被保留下來,再次參加生殖活動。對于資源量已很少或是人工養成的成熟親魚來講,這種方法是最合理的。
鱘魚成熟卵的人工授精主要采用干導法,即先將卵置于盆中,每盆約4萬~7萬粒卵。加入1~2毫升精液,攪動精卵,使其混合。加入江水繼續攪拌約5分鐘之后,倒掉上面的體腔液和多余的精液,漂洗2~3次。這樣授精工作即已完成,鱘魚的精子大,而且激活后的壽命較長,因此也可以采用先加水激活精子,立即倒入盛卵盆中的授精方法。實驗的結果說明,這種方法更能有效提高受精率。
二、受精卵的脫粘處理
目前史氏鱘人工繁殖中的脫粘劑主要是滑石粉,材料即為市售的滑石粉,脫粘劑為20%的滑石粉懸濁液。脫粘時,在盆中注入清潔的孵化水,加入提前泡好的滑石粉液,慢慢攪動魚卵,如果有卵粘連現象,用手撥開,每10分鐘換一次洗液,棄去舊的溶液,加入新水和滑石粉。重復這項操作至卵完全不粘手為止,用孵化水沖洗至水清為止,放入孵化器中孵化,脫粘時間一般為30~50分鐘。脫粘的具體操作方法有二種:
(一)手工法
在脫粘過程中用手在脫粘容器中攪動卵,使之與脫粘劑不斷充分接觸,不發生粘連,直至卵不粘手為止。為不使溫度變化過大,應將脫粘容器放在孵化水中。攪動時動作必須輕而緩,以卵能翻動與脫粘劑充分接觸為度。
(二)機械脫粘法
在機械脫粘法中,實際效果較好的是充氣脫粘。充氣脫粘的主要設備有氣泵和錐形瓶。氣泵的出氣口通過管路與錐形瓶的下口相連,脫粘時將受精卵和脫粘劑倒入錐形瓶中,充分使瓶中的卵不斷翻動(圖1)。充氣量的調整以卵和脫粘劑不在瓶底停留為度,脫粘達到要求的時間后,拔出充氣管,放出魚卵,沖洗后轉入孵化器。
三、受精卵的孵化
史氏鱘受精卵的孵化與其他養殖魚類有所不同。鱘魚的卵粒較大,沉性強,但孵化過程中又必須有一定的翻動。這就決定了它所使用的孵化方法和孵化器具有獨立的特性。
采集:鄧潔
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