斑點叉尾鮰傳染性套腸癥是近年來在我國發(fā)生的一種斑點叉尾鮰的新型細菌性傳染病，危害很大，已經連續(xù)幾年造成了大批的斑點叉尾鮰發(fā)病死亡，嚴重地威脅著斑點叉尾鲴養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。目前初步認為該病是由嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌引起的斑點叉尾鮰的急性致死性傳染病，以發(fā)生嚴重的腸炎、腸套疊和脫肛為特征，在短時間內即可引起大批的斑點叉尾鮰死亡，我們稱此病為斑點叉尾鮰傳染性套腸癥。由于該病具發(fā)病突然，來勢兇猛，傳染快，呈流行性，死亡快，發(fā)病率和死亡率均高等特點，故初期又稱其為斑點叉尾鮰急性流行性傳染病。該病的致病病原和病理變化特征都是在水生動物疾病中罕見的，在此之前，國內外都還未見該菌感染斑點叉尾鮰致病的報道。

　　一、流行情況

　　該病最早發(fā)現于2004年3月下旬，首先在四川省成都市郊的龍泉湖網箱養(yǎng)殖的斑點叉尾鮰發(fā)生了一種前所未見的新型暴發(fā)性傳染病，該病來勢兇猛，具有發(fā)病突然、傳染快、死亡率高等特點，在出現癥狀后的1～2天即發(fā)生大規(guī)模死亡，死亡率一般在90%以上，有的網箱幾乎達100%。我們通過仔細的病理剖解和觀察，發(fā)現了一種在魚類非常罕見的特征性病理變化即腸套疊，而且這種腸套疊的出現率很高，可達60%～95%，病魚一旦出現腸套疊后即不吃食，并很快就發(fā)生死亡。相隔一周左右，本病又相繼在四川的三臺縣魯班湖、中江縣繼光水庫、仁壽縣黑龍灘水庫和簡陽縣三岔湖等地網箱和大邑、崇州、新津、眉山等縣市的池塘養(yǎng)殖的斑點叉尾鮰中發(fā)生大規(guī)模暴發(fā)與流行。2005年和2006年3月，該病又連續(xù)發(fā)生并繼續(xù)蔓延擴散，不但在四川許多養(yǎng)殖斑點叉尾鮰的地區(qū)紛紛發(fā)生該病，并在重慶、貴州、云南和湖;比等省也出現該病流行，有些地區(qū)甚至對斑點叉尾鮰的養(yǎng)殖產生毀滅性的打擊，魚整池、整箱死亡。估計這幾年的直接經濟損失達億元。

　　自然情況下主要感染斑點叉尾鮰，魚苗、魚種和成魚均可感染，其他鮰科魚類也可感染，但在相同養(yǎng)殖條件下的有鱗魚未見感染發(fā)病季節(jié)主要在春夏，3～9月是其發(fā)病的時期，但以3～5月高發(fā)，一般是每年的3月下旬或4月初開始發(fā)病，發(fā)病水溫多在16℃以上，并隨水溫的升高病程縮短。發(fā)病急，死亡快，病程短，一般病程在2～5天，發(fā)病率在90%以上，死亡率90%以上，嚴重的達100%。

　　二、病原

　　該病的病原初步認為是斑點叉尾鮰源嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌屬于非發(fā)酵型，專性需氧不形成芽孢的革蘭氏陰性菌，廣泛分布于各種水源、土壤和植物根系等，可引起動物發(fā)生敗血癥、心內膜炎、肺炎、結膜炎、腦炎、尿道、消化道感染和傷口感染等。

　　我們于2004年從發(fā)病的四川省成都市的龍泉湖、三臺縣魯班湖、仁壽縣黑龍灘水庫和簡陽縣三岔湖等地網箱養(yǎng)殖的斑點叉尾鮰病魚的體內（肝、腎）分離到一株病原菌。該菌株為革蘭氏陰性桿菌，極生多鞭毛，無莢膜，無芽孢，鞭毛數≥2。在普通營養(yǎng)瓊脂菌落呈灰白色，圓形，表面光滑，邊緣整齊的半透明菌落;在 TSA平板上形成圓形，表面光滑，邊緣整齊，直徑為0.8～1.2毫米的透明的無色菌落;在兔血平板上出現明顯的β溶血環(huán)。為非發(fā)酵型，嚴格需氧，生長溫度范圍為15～41℃，最適生長溫度為25～30℃，在含鹽量5%以下的培養(yǎng)基上能生長，生長的pH范圍為5.0～9.0，最適pH6.0～7.0，對除麥芽糖和甘露糖以外的多種糖類不利用產酸，氧化酶陰性，DNA酶、蛋白酶、脲酶、賴氨酸脫羧酶陽性，MR、VP陰性，H2S陰性，凍化牛奶，液化明膠。根據該菌的形態(tài)學特征和生理生化特性初步確定為嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌，再結合16SrDNA序列分析進行準確的鑒定，在系統(tǒng)發(fā)育樹上與其他的嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌菌株聚在一簇，其同源性在99.4%～99.6%之間，從而在分子生物學水平確切鑒定該菌為嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。

　　我們通過對斑點叉尾鮰傳染性套腸癥的病原嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的一些致病因子進行研究，發(fā)現該菌胞外產物具有溶血活性、Veto細胞毒性、腸毒性、蛋白酶活性、脂酶活性、DNA酶活性和動物致死性，該菌胞外產物接種健康斑點叉尾鮰后，也出現體表的褪色斑、腹水、腸炎、腸套疊和肝、脾、腎腫大等病變，這與該活菌感染發(fā)病的病變相似，表明嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌胞外產物在其致病機制中有著重要的作用。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌能產生一種分子量為20.76KD多肽的外毒素。該外毒素接種斑點叉尾鮰，出現與嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌感染的相似癥狀與病變。

　　三、癥狀與病理變化

　　發(fā)病初期病魚表現為游動緩慢，靠邊或離群獨游，食欲減退或喪失，鰭條基部、下頜及腹部充血、出血。隨病程的發(fā)展病魚腹部膨大，體表出現大小不等的、色素減退的圓形或橢圓形的褪色斑，大的褪色斑塊直徑3 厘米，以后在褪色斑的基礎上發(fā)生潰瘍。小的潰瘍灶直徑0.3～0.5毫米，大的潰瘍灶直徑達3厘米;部分魚垂死時出現頭向上、尾向下、垂直懸掛于水體中的特殊姿勢，最后病魚沉入水底死亡，當提拉網箱檢查時才發(fā)現箱底沉有大量的死魚。發(fā)病率90%左右，死亡率80%以上。病死魚的解剖變化主要表現為腹部膨大，肛門紅肌外突，有的魚甚至出現脫肛現象，后腸段的一部分脫出到肛門外，剖開體腔，腹腔內充滿大量清亮或淡黃色或含血的腹水，胃腸道內沒有食物，胃底部和幽門部粘膜充血、出血;腸道充血，出血，腸壁變薄，腸腔內充有大量含血的粘液，腸道發(fā)生痙攣或異常蠕動，常于后腸出現1～2個腸套疊，套疊的長度為 0.5～2.5厘米，發(fā)生套疊和脫肛的腸道明顯充血、出血和壞死，部分魚還見前腸回縮進入胃內的現象。肝腫大，顏色變淡發(fā)白或呈土黃色，部分魚可見出血斑，質地變脆，膽囊擴張，膽汁充盈;脾、腎腫大，淤血，呈紫黑色;部分病魚可見鰾和脂肪充血和出血。

　　組織病理學上，主要病理損傷是全身廣泛性水腫、細胞腫脹、變性、壞死和炎癥細胞浸潤，特別是肝、腎、胃腸道和骨骼肌的損傷較為嚴重，為其損傷的靶器官。在細胞病理學上，病魚肝腎脾腸等器官的細胞均有較為嚴重的損傷，細胞腫脹，超微結構破壞，特別是線粒體和細胞核的損傷很明顯。線粒體表現為腫脹，嵴斷裂，或溶解消失，呈空囊狀;細胞核變形、染色質溶解或發(fā)生濃縮、裂解、邊移，甚至形成類似凋亡小體的結構。

　　四、診斷

　　1，根據本病的癥狀與病理變化，本病主要表現為體表（特別是腹部和下頜）充血、出血和褪色斑，腹部膨大，腹腔內充有淡黃色或帶血的腹水，胃腸道粘膜充血、出血，腸道發(fā)生，甚至腸脫，腸腔內充滿淡黃色或含血的粘液，特別是腸套疊是本病的特征性變化，而且這種腸套疊的出現率很高，可達60%～95%。這種特征性的損傷具有重要的證病意義。

　　2.對本病的確診須從靶組織內分離到的革蘭氏陰性嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌。病魚肝臟和腎臟是最佳病原菌分離器官，血液也是分離病原菌的良好病料。該菌株為革蘭氏陰性桿菌，極生多鞭毛，無莢膜，無芽孢，在普通營養(yǎng)瓊脂菌落呈灰白色、圓形、表面光滑、邊沿整齊的半透明菌落;在兔血平板上出現明顯的β溶血環(huán)。為非發(fā)酵型，嚴格需氧，生長溫度范圍為15～41℃，最適生長溫度為25～30℃，根據該菌的形態(tài)學特征和生理生化特性，再結合16SrDNA序列分析進行準確的鑒定。

　　3.一旦懷疑發(fā)生本病應盡快采樣送有關實驗室診斷。采取癥狀明顯、具有代表性的斑點叉尾鮰病魚。采樣要取活體或瀕臨死亡的斑點叉尾鮰病魚，采樣時間越早越好。采集病魚整體時，一般根據大小采取10～20尾即可。活魚用充氧袋封裝，保證氧氣充足，使之成活。用泡沫箱封裝，先在箱底鋪一層冰，頭腹向上，層魚層冰，加封頂冰，使魚體溫度保持在0～5℃。有條件的單位可在清潔、無污染的條件下，對發(fā)病斑點叉尾鮰的血液、肝和腎進行無菌操作采樣送檢。采血應在發(fā)病期、并未經藥物治療期間進行，血液應脫纖或加肝素鈉抗凝劑，但不可加入抗生素，用經滅菌消毒的帶蓋塑料離心管盛裝，密封后，貼上標簽，用泡沫箱封裝，并在離心管周圍加冰塊，使血液病料溫度保持在0～4℃。若不能及時運送，須置4℃冰箱內作暫時保存，但時間不宜過久，以免溶血。組織樣品，應新鮮并以無菌技術采集，采集的組織分別放入滅菌的容器或滅菌的塑料袋內，貼上標簽，用泡沫箱封裝，并在樣品周圍加冰塊，使病料溫度保持在 0～4℃。也可作暫時凍結，用泡沫箱封裝，并在樣品周圍加冰塊，但凍結時間不宜過長。

　　4.由于本病發(fā)生的歷史較短，在對該病快速準確的診斷方法研究上還較少，今后將應加強研究，加強檢疫和對本病的監(jiān)測，尤其是研制本菌毒素檢測試劑盒。

　　五、防治

　　由于該病具有發(fā)病突然，傳染快，流行廣，死亡率高，一旦發(fā)病后很難控制等特點，因此對該病的防治應根據發(fā)病特點及病原的特性有針對性地采取防控措施。當發(fā)生該病時，應盡早診斷，盡早治療。

　　（一）預防

　　1.要加強飼養(yǎng)管理，尤其是水質、氣候突變的時候要注意防病，改善水體環(huán)境條件，科學飼喂，盡量減少低溶氧和惡劣的水環(huán)境等應激因子的刺激，特別是高密度會增加本病發(fā)生的機會，故放養(yǎng)密度不宜過大，并經常加注新水。

　　2.育健壯無病的優(yōu)良斑點叉尾鮰苗種，魚種盡量就地培養(yǎng)，減少搬運，并注意下塘或進箱前進行魚體消毒。可用5～10毫克/升的高錳酸鉀水溶液藥浴5～15分鐘。發(fā)病魚池或網箱用過的工具要進行消毒，病死魚要及時撈出深埋，而不能到處亂扔。

　　3.本病是在開春后（一般是每年的3月下旬或4月初）開始發(fā)病，發(fā)病水溫多在16℃以上，因此要及早預防，在飼料中添加一些免疫增強劑（如酵母多糖、黃芪多糖等）以提高魚體的免疹力和抗病力，或投喂病原菌敏感的藥物，預防該病的發(fā)生。

　　4.免疫預防是本病最有效最關鍵的預防措施。因此研制出有效的免疫疫苗將對該病的預防控制起著重要作用。用超聲粉碎菌體疫苗和用福爾馬林滅活疫苗都可刺激魚體產生抗體，產生保護免疫，凝集抗體可持續(xù)120天以上。我們對斑點叉尾鮰源嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌進行了初步疫苗的研制，以強毒株制成全菌體的滅活疫苗，采用腹腔注射、浸泡和口服法對健康斑點叉尾鮰進行了免疫接種，其中浸泡和口服法還分別進行了加強免疫，實驗魚對嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的血清凝集抗體效價及其對嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌的抵抗力均顯著提高，使用過本疫苗的魚均獲得了較高的保護率，在本病2006年又暴發(fā)流行時，經免疫過的斑點叉尾鮰幾乎未見發(fā)病。

　　5.同時我們還研制了一種斑點叉尾鮰專用生物保健劑，該產品含有多種高活性的生物因子，具有強力提高魚體免疫力、增強魚體抵抗力、提高魚體成活率的作用。對斑點叉尾鮰腸套疊型傳染病、腸型敗血癥、細菌性出血癥、腹水癥等幾種危害大的細菌性疾病具有很強的抵抗作用，顯著減少感染發(fā)病，保護率高，促進斑點叉尾鮰的健康生長。本品用法為每100千克魚每天用本品5～10克，拌在飼料中，制成顆粒料，連喂3天;或每100千克魚每天用本品10～20克，連喂 2～3天。具有顯著的防治效果。

　　（二）治療

　　應在做好預防工作的基礎上，采取藥物外用與內服結合治療。

　　1.本病所造成的經濟損失大小與藥物使用的早遲有關，如果懷疑為本病發(fā)生時，應盡快做病原菌的分離鑒定和藥敏試驗，選擇敏感藥物進行治療，若疾病已開始流行，來不及做病原的分離鑒定和藥物敏感試驗時，可先用一些藥物投喂，隨后再根據藥物敏感性試驗的結果選擇治療藥物。

　　2.篩選高效的無公害防治藥物（包括外用消毒劑和內服的中藥、西藥），進行綜合防治。在采用藥物防治該病時尤其要注意根據藥敏實驗結果合理選用抗菌藥物，這是決定藥物防治該病成敗的關鍵。因為嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌具有多重耐藥性，對多數常用的抗菌藥物都有抗性，且對一些開始敏感的藥物也很快會產生耐藥性，且有時在相同病例分離的不同菌株的抗藥性都不盡相同，因此對藥物的治療選擇非常困難。這給該菌感染的治療帶來很大的困難。

　　3.我們對從四川省主要的發(fā)病區(qū)分離到的病原進行了藥物敏感性實驗，證實復方新諾明、萘啶酸、氟哌酸、氧氟沙星、洛美沙星、阿齊霉素、慶大霉素、丁胺卡那和強力霉素、氟苯尼考等都是對病原菌敏感的藥物，若及時使用，一般在1～2個療程即可控制該病。復方新諾明第一天100毫克，第二天開始藥量減半，拌在飼料中投喂，5天為一個療程。萘啶酸、氟哌酸、氧氟沙星、洛美沙星每天每千克魚用10～30毫克，制成藥餌投喂，每天一次，連用3～5天。洛美沙星、阿齊霉素、慶大霉素、丁胺卡那和強力霉素、氟苯尼考等每千克魚用5～20毫克制成藥餌投喂，每天一次，連用3～5天為一個療程。但嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌感染在經過治療、癥狀消失后，往往具有較高的復發(fā)率，可達到10%～45%。

　　4.水體消毒可用漂白粉1克/立方米;漂白粉精（有效氯60%～65%）0.2～0.3克/立方米;二氧化氯0.1～0.3克/立方米或二氯海因、溴氯海因0.2～0.3克/立方米全池潑灑或網箱水體消毒。

                                              南方漁網編輯：陳如燕