老虎斑(Epinephelus fuscoguttatus)是華南沿海一種重要的海水養(yǎng)殖魚類，近年來，海南陵水和廣東陽(yáng)江等地養(yǎng)殖的老虎斑出現(xiàn)大量不明原因死亡，給養(yǎng)殖企業(yè)或個(gè)體戶帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所魚病研究團(tuán)隊(duì)經(jīng)過調(diào)查和科學(xué)實(shí)驗(yàn)，于2014年對(duì)該病進(jìn)行了報(bào)道，并將這一新的海水魚類寄生蟲命名為石斑魚錐體蟲(Trypanosoma epinepheli)，該寄生蟲引起的疾病對(duì)石斑魚養(yǎng)殖業(yè)有一定的潛在危害，應(yīng)當(dāng)引起業(yè)界重視。

　　臨床癥狀

　　輕度感染時(shí)，老虎斑食欲降低，精神萎靡，體質(zhì)衰弱，貧血，消瘦。重度感染時(shí)，老虎斑表現(xiàn)出嚴(yán)重貧血，鰓蒼白，脾臟發(fā)黑、腫大，可引起老虎斑大量死亡(圖 A, B)。

　　病原特征

　　錐體蟲是寄生在魚類、兩棲類、爬行類、鳥類、哺乳類以及人血液或組織細(xì)胞內(nèi)的單細(xì)胞鞭毛蟲，是人、獸和魚的重要寄生蟲之一。雖然在形態(tài)上只是單個(gè)細(xì)胞，但在生理上能夠和高等動(dòng)物一樣進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)、呼吸、消化、排泄、行動(dòng)、生殖等各種機(jī)能。錐體蟲通常只有十幾到一百多微米，需要借助顯微鏡才能觀察到。石斑魚錐蟲體型稍小，平均體長(zhǎng)22.3微米，體寬1.7微米，有一個(gè)位于體中央的細(xì)胞核，波動(dòng)膜較窄，有一條鞭毛，平均長(zhǎng)度10.1微米，自生毛體處伸出，由蟲體后端沿著身體往前延伸。動(dòng)基體位于蟲體后端約1/4處，是線粒體內(nèi)的一個(gè)特殊結(jié)構(gòu)，含有豐富的 DNA，能進(jìn)行自我復(fù)制，錐體蟲的成熟期大部分呈“S”形(圖 C-F)。

　　石斑魚錐體蟲的生活史

　　石斑魚錐體蟲在魚體內(nèi)的生活史比較復(fù)雜，隨水蛭吸血感染魚體后，錐體蟲首先經(jīng)歷一個(gè)潛伏期，這一時(shí)期大約持續(xù) 1周左右，但這一時(shí)期在魚體的外周血中一般不能觀察到蟲體的存在。隨后是發(fā)展期，這一時(shí)期能持續(xù)幾天到幾周不等。由于這一時(shí)期錐體蟲進(jìn)行二分裂，在魚體外周血中可以觀察到大量鞭毛蟲的纖細(xì)體型，錐體蟲大量的繁殖可以導(dǎo)致寄主的死亡。

　　石斑魚錐體蟲病的診斷

　　當(dāng)魚出現(xiàn)食欲下降、嗜睡及鰓絲蒼白和脾臟腫大時(shí)，疑似感染錐體蟲。進(jìn)一步抽取血液，分兩部分，一部分制作血液涂片，通過吉姆薩染色，觀察血液中是否有大量的石斑魚錐體蟲蟲體，蟲特征參照上述描述和圖1 C-F所示;另一部分血液離心后提取全部DNA，然后用特異性引物(上游引物：5’-GAC TTT TGC TTC CTC TAT TG-3’;下游引物: 5’ –CAT ATG CTT GTT TCA AGG AC-3’)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增出的片段序列進(jìn)行分析，比較與NCBI上公布的石斑魚錐體蟲18S DNA序列(JQ999962)的相似度，作出最終的診斷。